ساخت پلاسمید نوترکیب جدید حامل دو ژن خودکشی سلولی hsv-tk و yeast-cd به منظور دستکاری ژنتیکی لیشمانیا

نویسندگان

عباس دوستی

abbas doosti شهرکرد -رحمتیه-دانشگاه آزاد اسلامی- مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی نوشین داودی

nooshin davoudi assistant professor, biotechnology, research center, pasteur institute of iran فریدون مهبودی

fredoun mahboudi associated professor, biotechnology research center, pasteur institute of iran.

چکیده

زمینه و هدف: لیشمانیوز به گروهی از بیماریهای انگلی ناشی از گونه های مختلف لیشمانیا اطلاق می شود که اشکال بالینی گوناگونی دارد. این انگل در انسان و حدود 100 گونه حیوان ایجاد بیماری می نماید و در بخش های وسیعی از جهان و از جمله ایران شایع است. یکی از زمینه های دستیابی به واکسنی مؤثر علیه لیشمانیا، دستکاری ژنتیکی این تک یاخته و استفاده از انگل مهندسی شده به عنوان واکسن می باشد. هدف از این تحقیق طراحی و ساخت کاست ژنی جدیدی است که به منظور وارد ساختن ژنهای خودکشی سلولی شامل hsv-tk و yeast-cd به ژنوم لیشمانیا طراحی گردیده است. روش بررسی: در یک مطالعه آزمایشگاهی ابتدا دو قطعه ژن تیمیدین کیناز ویروس هرپس سیمپلکس (hsv-tk) و سیتوزین دآمیناز مخمر ساکارومایسس سرویزیه (yeast-cd) به همراه ژن آلفا توبولین لیشمانیا (atub) با ترتیب tk-αtub-cd در پلاسمید pbluscript کلون شدند. سپس مجموعه ژنی مذکور از پلاسمید pbluscript خارج گردیده و در پلاسمید pf4x1.4sat کلون گردید و به منظور تأیید کانستراکت نهایی از هضم برش توسط آنزیم های محدود الاثر استفاده شد. یافته ها: قطعات ژنی tk-αtub-cd با موفقیت در پلاسمید pbluscript کلون گردیده و صحت کلونینگ مورد تأیید قرار گرفت. سپس این مجموعه ژنی در پلاسمید pf4x1.4sat درج شد و صحت حضور و ترتیب قرارگیری این ژنها اثبات گردید. نتیجه گیری: سیستم طراحی شده در این تحقیق می تواند دو ژن خودکشی سلولی را به درون ژنوم لیشمانیا منتقل کند و در تحقیقات آینده در زمینه دستیابی به واکسن زنده علیه لیشمانیا مورد استفاده قرار گیرد. .

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ساخت پلاسمید نوترکیب جدید حامل دو ژن خودکشی سلولی HSV-tk و Yeast-cd به منظور دستکاری ژنتیکی لیشمانیا

زمینه و هدف: ‌لیشمانیوز به گروهی از بیماریهای انگلی ناشی از گونه های مختلف لیشمانیا اطلاق می شود که اشکال بالینی گوناگونی دارد. این انگل در انسان و حدود 100 گونه حیوان ایجاد بیماری می نماید و در بخش های وسیعی از جهان و از جمله ایران شایع است. یکی از زمینه های دستیابی به واکسنی مؤثر علیه لیشمانیا، دستکاری ژنتیکی این تک یاخته و استفاده از انگل مهندسی شده به عنوان واکسن می باشد. هدف از این تحقیق ط...

متن کامل

طراحی و ساخت سازه‌ ژنی نوترکیب بیان کننده ژن حفاظت کننده سلولی

Background : Genetic manipulation is an effective strategy to protect cells against environmental damages and enhance their capabilities for therapeutic usage. In order to avoid unwanted side effects, such as cancers, the expression of genes should be temporary increased. The aim of this study was to clone and temporary increased expression of a cell protective gene, Metallothionein 1 (MT1) in ...

متن کامل

طراحی و ساخت پلاسمید نوترکیب حاوی ترکیب ژن های ag۸۵b و tb۱۰.۴ مایکوباکتریوم توبرکولوزیس

پیش زمینه و هدف: علی رغم استفاده از واکسن ب.ث.ژ از سال 1921 تابه حال، هنوز بیماری سل به عنوان دومین عامل مرگ ومیر در بین بیماری های عفونی محسوب می گردد. با افزایش مقاومت عامل مولد سل (مایکوباکتریوم توبرکولوزیس) به آنتی بیوتیک های معمول و وسیع الطیف و همچنین با ظهور hiv و عفونت این ویروس با مایکوباکتریوم توبرکولوزیس، مقابله با این بیماری بیشتر به چالش کشیده شده است. شناخت آنتی ژن های مؤثر در ایم...

متن کامل

طراحی و ساخت پلاسمید نوترکیب حاوی ترکیب ژن‌های Ag85B و TB10.4 مایکوباکتریوم توبرکولوزیس

Background & Aims: Tuberculosis (TB), caused by Mycobacterium tuberculosis (Mtb), remain as a leading causes of mortality among infectious diseases. The only current vaccine, bacillus Calmette-Gue´rin (BCG), displays highly variable efficiency for preventing tuberculosis. Thus, identification of protective antigens could be mentioned for designing new vaccines. Among different Mtb antigens,...

متن کامل

طراحی و ساخت نانو زیست ذرات فاژی نوترکیب به عنوان کاندیدای حامل واکسن ژنی- خوراکی

  Background and Objective : Bacteriophage vectors recently have been considered as a gene transfer and vaccine delivery vehicles chiefly due to their low cost, safety, and physical stability. Since, little is known about phage mediated gene transfer in mammalian hosts, A group of invitro experiments were performed to ascertain gene transfercapability of these vehicles .   Materials and Methods...

متن کامل

همسانه‌سازی و بیان ژن نوترکیب CD40Lانسانی در رده سلولی HEK293

چکیده سابقه و هدف CD40L ، پروتئینی غشایی و یکی از اعضای خانواده TNF است که نقش مهمی در انتقال پیام سلولی در ایمنی ذاتی و تطبیقی دارد. از آن جایی‌که این پروتئین نقش خود را از طریق تجمع گیرنده در سطح سلول هدف ایفا می‌کند، به ‌نظر می‌رسد فرم مالتی‌‌مری آن بتواند اثر قوی‌تری نسبت به فرم طبیعی ترایمری ایجاد کند. بر ‌این اساس در این مطالعه کلونینگ و بیان فرم کایمری و دودکامری CD40L محلول، از طریق پر...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد

جلد ۹، شماره ۲، صفحات ۸-۱۳

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023